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常規(guī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭谱鳎◤?fù)制)方法

常規(guī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭谱鳎◤?fù)制)方法

一、腫瘤動(dòng)物模型的建立

將對(duì)數(shù)生長的腫瘤細(xì)胞收集 , 用無血清基質(zhì) 10.0ml, 于 1500 轉(zhuǎn)/ 分, 離心3min, 連續(xù)洗 3 次, *后用無血清基質(zhì)混勻, 用血球計(jì)數(shù)器計(jì)算腫瘤細(xì)胞數(shù)量( 平均 5 個(gè)中方格的細(xì)胞計(jì)數(shù)×104即是腫瘤數(shù)/ 毫升) 。 計(jì)算完腫瘤細(xì)胞總數(shù), 再將 腫瘤細(xì)胞密度調(diào)至 4×106 個(gè)/ml, 每只小鼠腋下接種 50ul(即 2×105個(gè)腫瘤細(xì)胞), 2周左右可捫及腫瘤小節(jié)結(jié)。一般選取 6-8 周的小鼠,不同的腫瘤細(xì)胞接種的數(shù)量和動(dòng)物不一樣, 比如 LL/2,B 16, Hep 可接種 C57 和 BAL B/C 小鼠, NS-1,EL-4, C26,Meth A 可接種 BAL B/C 小鼠, H22接種昆明鼠。從腫瘤接種后可捫及小結(jié)節(jié)開始, 每 3 天用游標(biāo)卡尺量腫瘤縱橫大小( 單位:mm), 至少連續(xù)一個(gè)月時(shí)間。

注意要設(shè)計(jì)不同的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組, 每組動(dòng)物數(shù)一般為 5-10 只, 一般接種腫瘤6-8 周后,小鼠的腫瘤可生長至直徑為 15-20mm ( 即小鼠會(huì)瀕臨死亡) 時(shí), 可眼球取血,分離血清并保存血清, 處死小鼠, 取腫瘤組織照相, 取部分腫瘤組織作 冰凍組織切片( 或- 80℃ 保存), 作相應(yīng)的**組織化學(xué)染色 , 取部分腫瘤組織用3%中性的甲醛固定, 石臘包埋, 作常規(guī)HE 染色。

二、神經(jīng)系統(tǒng)**動(dòng)物模型復(fù)制方法

1、腦瘤模型可用甲基膽蒽等化學(xué)致癌埋于皮層,或用腫瘤移植的方法復(fù)制腦腫瘤。

2、腦卒中模型常用顯微手術(shù)結(jié)扎大鼠、貓、狗的大腦中動(dòng)脈和將自凝血塊注入頸內(nèi)動(dòng)脈,引起梗塞。

3、癲癇模型家兔肌肉注射馬桑內(nèi)酯或噪音刺激大鼠等方法常用作復(fù)制癲癇模型。

4、腦水腫模型于頸內(nèi)動(dòng)脈內(nèi)注入傷寒內(nèi)**制作急性模型或外力作用引起外傷性腦水腫。 

三、消化系統(tǒng)**動(dòng)物模型復(fù)制方法

1、病毒性肝炎模型 常用方法是注射乙型肝炎病人血清復(fù)制乙型肝炎模型。膽大部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)甲型肝炎病毒不易感。我國已有報(bào)導(dǎo)紅面獼猴、恒河猴、人及野生樹鼩種毒后出現(xiàn)人甲型肝炎現(xiàn)象。近年來發(fā)現(xiàn)某些鴨肝炎病毒的特征與人肝炎病毒十分相似,故用鴨作為人肝炎模型也開始增多。

2、**性肝炎模型  慢性或遷延性肝炎患者體內(nèi)存在著抗肝細(xì)胞成分抗體。1959年國外有人用肝組織懸液加弗氏佐劑**豚鼠,成功地誘發(fā)了肝細(xì)胞變性及壞死等病變。也有人報(bào)導(dǎo)肝膜蛋白(LSP)加佐劑分次注射產(chǎn)生動(dòng)物**性肝炎模型。

3、胃、腸道潰瘍模型  在動(dòng)物身上復(fù)制胃、腸道潰瘍的方法較多,但所用的方法不同,引起的潰瘍病變也各有特點(diǎn)。常用的方法有:

1).應(yīng)激法  以各種強(qiáng)烈的傷害性刺激(如強(qiáng)迫制動(dòng)、饑餓、寒冷等),引起動(dòng)物發(fā)生應(yīng)激性潰瘍。如把動(dòng)物浸入冷水中或放在應(yīng)激箱中不斷地遭受電刺激,使之劇烈不安,一晝液即能引起胃粘膜出血及潰瘍。這種方法簡單,成功率達(dá)99%以上。

2).**法  給動(dòng)物投服或注射一定量的組織胺、胃泌素、腎上腺類固醇、水楊酸鹽、血清素、利血平、保泰松等可造成動(dòng)物胃腸潰瘍。如給豚鼠小劑量的組織胺,連續(xù)數(shù)天,可引起胃、十二指腸、食道等發(fā)生潰瘍。又如可用利血平、血清緊張素、阿斯匹林等誘發(fā)大白鼠或小白鼠的胃潰瘍。

3).燒灼法  用電極燒灼胃底部的胃壁,可造成象人的胃潰瘍病變;用濃醋酸給大鼠胃壁內(nèi)注射或涂抹于胃壁漿膜面上可造成慢性潰瘍。燒灼法復(fù)制胃、腸道潰瘍模型的優(yōu)點(diǎn)是方法簡便,潰瘍部位可由作者自己選擇。

4).結(jié)乳幽門法  選用大鼠、小鼠或豚鼠,麻醉后,無菌技術(shù)下在劍突下由腹正中切開腹壁皮膚及肌層,切口長約3cm,暴露胃,沿胃向右,辯清幽門和十二指腸的聯(lián)結(jié)處,避開血管,于其下穿線,將幽門完全結(jié)扎。術(shù)后**禁食禁水。幽門結(jié)扎后,可刺激胃液分泌并使高酸度胃液在胃中潴留,造成胃潰瘍。這類潰瘍復(fù)制方法簡單,發(fā)生快,成功率高,但病變較表淺,嚴(yán)格地說仍然屬于胃粘膜急性出血性糜爛,與人類胃潰瘍的典型病變差距較大,適于作探索抗?jié)儾?*研究和胃潰瘍發(fā)病學(xué)方面的研究。

   其他還可用外科手術(shù)方法從腸道上部排除可中和胃酸的堿性膽汁、胰液或十二指腸液造成潰瘍。還可用刺激、損傷或毀損腦組織等方法造成潰瘍。

4、胰腺炎模型  復(fù)制胰腺炎模型可采用使胰液外分泌發(fā)生潴留;使各種胰酶在胰管系統(tǒng)內(nèi)活化;感染或某些微生物**的作用,影響胰腺的營養(yǎng)、代謝等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用狗、兔和大鼠。將狗自身膽注按0.5ml/kg體重緩慢注入狗胰腺體尾交界處的胰腺實(shí)質(zhì)內(nèi),則可引起胰腺局部組織壞死及炎性浸潤,與人類急性胰腺炎和病變相似。用大腸桿菌懸液9億/ml,按1ml/kg體重,向兔胰管內(nèi)逆進(jìn)注射可誘發(fā)急性胰腺炎。另外也可采用大鼠腹腔內(nèi)連續(xù)注射乙硫胺酸誘發(fā)成功胰腺炎模型。隨著乙硫胺酸注射時(shí)間的延長,胰腺組織可以出現(xiàn)廣泛進(jìn)行性破壞和退化及胰酶水平的持續(xù)下降。常規(guī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭谱鳎◤?fù)制)方法

5、糖尿病模型  糖尿病模型的復(fù)制方法采用注射致高血糖因子;手術(shù)切除胰腺的全部或大部;用四氧嘧啶(Alloxan)破壞胰島β細(xì)胞,造成胰性糖尿??;注射根皮苷使腎小管對(duì)糖的再吸收發(fā)生障礙并破壞酯酶致使葡萄糖磷酸化過程和脫磷酸過程障礙,引起根皮苷糖皮。四氧嘧啶復(fù)制的糖尿病動(dòng)物模型是目前研究人類糖尿病較好的方法,其實(shí)驗(yàn)性糖尿病近似人類糖尿病,體內(nèi)代謝障礙時(shí)有可能產(chǎn)生此種衍生物,胰島外分泌部不受損傷,幾乎所有常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物都可用來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。模型胰島的β細(xì)胞不是功能消失,而是功能不同程度的降低,有利于研究胰島組織再生和功能恢復(fù),動(dòng)物不必注射胰島素即可存活很久。大鼠造型劑量為12mg/100g體重,家兔為150~200mg/kg體重,狗約為50~60mg/kg體重。家兔根皮苷皮糖尿病造型劑量為0.5%根皮苷按15m/kg體重,皮下注射。注意所用四氧嘧啶和根皮苷溶液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。

四、呼吸系統(tǒng)**動(dòng)物模型復(fù)制

1、慢性支氣管肺炎模型  常選用大鼠、豚鼠或猴吸入刺激性氣體(如二氧化硫、氯、氨水、煙霧等)復(fù)制人類慢性氣管炎?,F(xiàn)發(fā)現(xiàn)豬粘膜下腺體與人類相似,且經(jīng)常發(fā)生氣管炎及肺炎,故認(rèn)為是復(fù)制人類慢性氣管炎較合適的動(dòng)物。用去甲腎上腺素可以引起與人類相似的氣管腺體肥大。

2、肺氣腫模型  給兔等動(dòng)物氣管內(nèi)或靜脈內(nèi)注射一定量木瓜蛋白酶、菠羅蛋白酶(Bromelin)、敗血酶(Alcalas)、胰蛋白酶(Trypsin)、致熱溶解酶(Thermolysin),以及由膿性痰和白細(xì)胞分離出來的蛋白溶解酶等,可復(fù)制成實(shí)驗(yàn)性肺氣腫。以木瓜蛋白酶形成的實(shí)驗(yàn)性肺氣腫病變明顯而且典型,或用瓜蛋白酶基礎(chǔ)上再加用氣管狹窄方法復(fù)制成肺氣腫和肺心病模型,其優(yōu)點(diǎn)是病因病變更接近于人。猴每天吸入一定深度的SO2和煙霧(**絲50g,持續(xù)2.5小時(shí)),一年后,可出現(xiàn)不同程度的肺氣腫。這種模型比較符合人的臨床發(fā)病規(guī)律,有利于進(jìn)行肺氣腫的病理生理及****研究。還可用1%三氯化鐵水溶液1~3ml,自兔耳靜脈注入,每周2~3次,可在短期內(nèi)造成肺心病模型。

3、肺水模腫型  用氧化氮吸入可造成大鼠和小鼠中毒性肺水腫,或用氣管內(nèi)注入50%葡萄糖液(家兔及狗分別為1及10ml)引起滲透性肺氣腫。麻醉下用37~38℃生理鹽水注入兔頸外靜脈或股靜脈使血液總量增加0.6~1倍(血液總量相當(dāng)體重1/12),可形成稀血性多血癥肺水腫。切斷豚鼠、家兔、大鼠頸部兩則迷走神經(jīng)可引起肺水腫。家兔(1.5~2kg)耳靜脈注入1∶1000腎上腺素0.54~0.6毫克,可使動(dòng)物發(fā)生肺水腫并在5~15分鐘死亡,肺系數(shù)自4.1~5g/kg增至6.3~12.5g/kg;5mg腎上腺素肌注,8分鐘左右大鼠死亡,肺系數(shù)20g/kg,靜脈注入10%氯仿(兔0.1ml/kg,狗0.5ml/kg)也可引起急性肺水腫。腹腔注入6%氯化銨水溶液可引起大鼠(0.4ml/kg)、豚鼠(0.5~0.7ml/kg)肺水腫。

4、支氣管痙攣、**模型   常選用豚鼠復(fù)制急性過敏性支氣管痙攣。用生理鹽水配成1∶10雞蛋白溶液作致敏抗原,給每只(250g體重)豚鼠腹腔內(nèi)注射0.5ml,致敏注射后1周,動(dòng)物對(duì)抗原的敏感性逐漸升高,至3~4周時(shí)*高。此時(shí)再用1∶3雞蛋白2ml加弗氏完全佐劑霧化(在霧化室內(nèi)),致敏動(dòng)物在此霧室內(nèi)十幾秒鐘到數(shù)分鐘內(nèi),就出現(xiàn)不安,呼吸加緊加快,然后逐漸減慢變?nèi)酰踔脸霈F(xiàn)周期性呼吸,直到呼吸停止而死亡。如果動(dòng)物致敏程度較輕或誘發(fā)時(shí)雞蛋白噴霧的濃度很快,則只發(fā)生一時(shí)性的支氣管痙攣,并不死亡。如改用組織胺噴霧,則不必予先致敏,就能引起豚鼠支氣管痙攣。組織胺用量依霧室大小而定,在83~103容量時(shí),1∶1000組織胺的用量0.5~1ml。

狗每周兩次暴露于犬弓蛔蟲(Toxocaracanis)、豬蛔蟲(Ascaris suum)或混合草籽浸出物的氣溶膠中可引起實(shí)驗(yàn)性**。給用10-8稀釋豬蛔蟲浸出物皮試陽性狗以豬蛔蟲氣溶膠吸入,也可引起**。常規(guī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭谱鳎◤?fù)制)方法

5、實(shí)驗(yàn)性矽肺模型  常選用大鼠、家兔或狗、猴來復(fù)制模型。取一定量含游離SiO299%以上的DQ-12型石英粉,經(jīng)酸化處理后,選取尖粒95%在5μm以下的那一段混懸液,烤干后準(zhǔn)確稱取需用量加生理水制成混懸液(**),大鼠用50mg/ml,每只氣管內(nèi)注入1ml;家兔用120mg/ml,用塵量按120mg/kg體重計(jì)算,在暴露氣管后注入,均可復(fù)制成典型的矽肺模型。

五、心律失常動(dòng)物模型的復(fù)制

根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,既可在整體動(dòng)物身上復(fù)制心律失常,也可用離體心臟或心臟某部分組織塊體外灌流復(fù)制心律失常。常用的復(fù)制方法,有下列幾種:

1.心房撲動(dòng)和顫動(dòng)性心律失常  選用狗、貓等動(dòng)物,麻醉后開胸,暴露心臟,在人工呼吸下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)??捎酶哳l率電直接刺激心房壁,使每次刺激落心房肌復(fù)極時(shí)R或S波間隔;烏頭鹼溶液涂抹心房外面局部;擠壓動(dòng)物上下腔靜脈間的部位,同時(shí)給予電刺激;竇房結(jié)動(dòng)脈內(nèi)注入乙酰膽鹼或甲狀腺素制劑?;虿捎脛?dòng)物整體閉胸條件下,阻塞呼吸道或吸入低氧氣體。也可采用離體心房組織塊作實(shí)驗(yàn),將含有竇房結(jié)的哺乳動(dòng)物的離體心房組織塊浸放于低鉀溶液內(nèi)。

2.心室心動(dòng)過速和心室顫動(dòng)性心律失常  多選用狗、貓或兔、大鼠等整體心臟(開胸或閉胸)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。常使用造型**為烏頭鹼、洋地黃及腎上腺素。一般使用烏頭鹼緩慢靜脈注射造型。劑量:家兔100~150μg/kg,大鼠30~50mμg,小鼠5mμg。也可使用中毒劑量的洋地黃類**造型。還可使用高濃度的腎上腺素(豚鼠40μg/kg,貓、犬100μg/kg)快速靜注,可造成動(dòng)物多源性早搏、短陣性室性心動(dòng)過速等。這類模型可用于篩選抗心律失常**。其優(yōu)點(diǎn)為心律失常在幾分鐘自行消失,因此同一動(dòng)物可反復(fù)多次進(jìn)行心律失常實(shí)驗(yàn),便于觀察抗心律失常**作用的持續(xù)時(shí)間,并可進(jìn)行自身對(duì)照。

3.房室傳導(dǎo)阻滯和房室交接區(qū)傳導(dǎo)常性心律失常  多選用狗、貓,在麻醉開胸暴露心臟的情況下,于距犬心尖部1.5~2cm處的左室心肌內(nèi)注入熱生理鹽水(80~90℃)或95%酒精、25%硫酸10~15ml (貓和兔注入4~7ml),引起心肌大片的局部壞死性心律失常。也可在狗的房室交接部(即在左心房下部、心房、下腔靜脈和前房室溝三者交匯點(diǎn)的前上方約0.5cm處),用注射針頭垂直刺入房間隔下部房室結(jié)區(qū),緩緩注入95%或無水酒精2~5ml,造成核處組織壞死。還可采用豚鼠,自左心耳向左房內(nèi)注射腺苷5 μg,,注后1秒鐘左右,即出現(xiàn)典型的Ⅱ度或Ⅱ度以上的傳導(dǎo)阻滯,較嚴(yán)重時(shí),房室完全停搏,停搏時(shí)間與劑量呈平行關(guān)系,心率和心律僅在數(shù)秒或十幾秒即可恢復(fù)。此模型重復(fù)性好,但傳導(dǎo)阻滯持續(xù)時(shí)間短,不易用其進(jìn)行**觀察,如果注射腺苷劑量大,則傳導(dǎo)阻滯不易復(fù)原。除豚鼠外,腺苷對(duì)其他動(dòng)物一般不引起傳導(dǎo)阻滯。

4.竇房結(jié)心律失常  用雄性家兔,將細(xì)鋼絲變成直徑約0.8cm的半環(huán),纏繞少許棉花。以40%甲醛浸潤后,把此環(huán)放在上腔靜脈根部與右心房交界處1分鐘,動(dòng)物迅速出現(xiàn)心電圖改變,心率減慢50%左右,約6~8分鐘減至*低水平;P波多在1~2分鐘內(nèi)消失,形成交界性心律;在3~10分鐘內(nèi)發(fā)生ST段偏移(抬高、下降或先升后降);在心電圖改變的同時(shí),伴有動(dòng)脈壓下降,在第8分鐘降至*低水平。此方法造成的病竇成功率高,持續(xù)時(shí)間長(可達(dá)5小時(shí)),重復(fù)性好,模型較穩(wěn)定,發(fā)病機(jī)制及心電圖表現(xiàn)與臨床相。常規(guī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭谱鳎◤?fù)制)方法

六、Alzhermer病的動(dòng)物模型

     SD大鼠200-250克。用3%****鈉(35-40mg/kg體重)腹腔麻醉動(dòng)物后,固定在腦立體定位儀上(參照大鼠全腦立體定位圖譜),以前囟為零點(diǎn),選出進(jìn)刀坐標(biāo):前后坐標(biāo)(AP)1.8mm,中線旁開(L)坐標(biāo)1.0mm,腹側(cè)坐標(biāo)(v)4. 0mm。首先用牙科鉆在上述坐標(biāo)的鉆孔開骨窗,去除顱骨,挑開硬腦膜,用自制雙刃不銹鋼刀片(寬2mm,厚0.1mm)按上述坐標(biāo)從腦冠狀面插入腦內(nèi)。然后,將刀向外移動(dòng)1.5mm,再降刀1mm,并上下抽刀10余次,以完全切斷彎窿海馬傘。*后將刀片退至L1.0mm處,抽出刀片。

     動(dòng)物分組

1. 實(shí)驗(yàn)組:10只,按上述方法切斷左側(cè)穹窿海馬傘;

2. 假手術(shù)組:10只,開顱并挑開硬膜膜,切斷皮質(zhì),但不切斷穹窿海馬傘,*后縫合頭皮;

3. 空白對(duì)照組:10只,做水迷宮行為學(xué)檢測(cè)和電生理檢驗(yàn)。以Morris水迷宮行為學(xué)檢測(cè)。(提供兩種數(shù)據(jù))定位航行能力。

七、神經(jīng)系統(tǒng)**模型

    實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE) 是一典型的實(shí)驗(yàn)?zāi)P?。早?944年Ferraro根據(jù)對(duì)一系列實(shí)驗(yàn)結(jié)果的總結(jié),指出EAE和人的脫髓鞘病有相似之處。1947年Freund等報(bào)告,以腦或脊髓加Freund佐劑(FA) 進(jìn)行**,僅需一次注射就能引起豚鼠EAE,而且成功率相當(dāng)高。以后,以兔、小鼠、大鼠、 羊、貓、田鼠及猴等動(dòng)物用同樣方法均能復(fù)制成功,以豚鼠*為敏感。這里介紹用同種脊髓加FA進(jìn)行**復(fù)制EAE的方法。

     Freund氏左劑的制備參照Paterson的制法,液體石臘(c.p)8.5ml,無水羊毛脂(c.p)1.5ml,結(jié)核菌。用上述混合液配成4mg/ml的FA。高壓**后使用。

脊髓組織懸液:于實(shí)驗(yàn)當(dāng)時(shí),在無菌條件下先將豚鼠肝素化,然后經(jīng)胸主動(dòng)脈用生理鹽水灌洗至無血。取出脊髓,除去脊膜,稱重,用玻璃研磨器將脊髓研成勻漿,以生理鹽水配制成50%懸液。

脊髓-FA乳劑的制備:將脊髓組織懸液與FA按1:1混合,用注射器反復(fù)抽注,即成乳劑。

選用體重400g左右的豚鼠,于豚鼠的四個(gè)足掌肉墊各注射脊髓-FA 0.1ml, 每只豚鼠共注射0.4ml。注射后按常規(guī)飼養(yǎng)。

     **注射半月后,血清中逐漸出現(xiàn)抗脊髓抗體,皮膚試驗(yàn)呈延緩反應(yīng),而且豚鼠陸續(xù)出現(xiàn)后肢癱瘓,甚至大小便失禁,很易死亡。血清補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng):由豚鼠心臟抽血,以3,000轉(zhuǎn)/分離心30分鐘分離血清。 抗原為1%脊髓生理鹽水懸液,也經(jīng)3,000轉(zhuǎn)/分離心1小時(shí),取其上清液作試驗(yàn)用。補(bǔ)體為2應(yīng)用單位,溶血系統(tǒng)為2%綿羊紅細(xì)胞及2單位的溶血素。

    皮膚試驗(yàn):將豚鼠背部剃毛,用10%同種脊髓生理鹽水懸液0.1ml作皮內(nèi)注射, 注后當(dāng)時(shí)及24、48小時(shí)觀察皮膚反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)在注后當(dāng)時(shí)不見皮膚反應(yīng),而在24小時(shí)出現(xiàn)紅斑或硬結(jié),48小時(shí)仍存在,所以是延緩型反應(yīng)。

組織學(xué)檢查:在實(shí)驗(yàn)終了時(shí)處死動(dòng)物,取出腦及脊髓等欲檢查的臟器,福爾馬林固定,常規(guī)切片、染色作鏡檢??梢娂鼓ぜ爸醒牍苤車忻黠@的**樣組織浸潤、增厚,脊髓白質(zhì)內(nèi)有細(xì)胞浸潤的小灶狀病變及靜脈周圍呈套袖樣浸潤。神經(jīng)細(xì)胞有壞死,細(xì)胞核消失呈勻質(zhì)小體,或細(xì)胞體消失留下一空隙,以及細(xì)胞周圍有圓細(xì)胞浸潤等。在腦組織中可見到腦膜增厚,**樣細(xì)胞及單核細(xì)胞浸潤。室管膜及脈絡(luò)膜亦呈同樣變化。小靜脈及****周圍,則呈套袖狀細(xì)胞浸潤。腦實(shí)質(zhì)內(nèi)有小膠質(zhì)細(xì)胞組成的浸潤灶。有些星狀細(xì)胞呈核碎裂、胞漿蒼白、細(xì)胞變形等。上述變化以脊髓的病理改變和癱瘓*為一致,是*特異的變化,僅見于注射脊髓加FA引起癱瘓的動(dòng)物。血清抗體雖也有特異性,但與癱瘓或脊髓病變的程度無一致性關(guān)系;而皮膚反應(yīng)則既有特異性,又與癱瘓及脊髓病變呈一致性。文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)還曾指出,這種模型不能用血清抗體進(jìn)行傳遞,但用**細(xì)胞被動(dòng)傳遞則能成功。提示病變的本質(zhì)屬于細(xì)胞**機(jī)制。至于腦內(nèi)的變化,特異性較差,用FA或其它組織懸液加FA注射的動(dòng)物也能發(fā)現(xiàn),唯程度輕的多,可能是FA本身引起的,也可能因?yàn)槠渌M織和腦脊液之間有某些共同抗原性,從而引起交叉反應(yīng)之故。常規(guī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭谱鳎◤?fù)制)方法

八、動(dòng)物高血壓模型的建立

     1.直接刺激**神經(jīng)法

采用埋藏電極或借助于立位定各器,是刺激大白鼠或猴的側(cè)下丘腦防御警覺區(qū),可使動(dòng)物血壓明顯升高,心率加快和心輸出量增加等。

     2.神經(jīng)反射性高血壓

可選狗進(jìn)行,以波長0.1毫秒、頻率5~50次/秒的方波刺激狗的隱神經(jīng)、喉上神經(jīng)或精神迷走神經(jīng)**端,刺激時(shí)間為15秒,可使狗的收縮壓和舒張壓均升高20~100mmHg。

     3.腎源性加壓物質(zhì)的注射法

選用大白鼠、家兔或狗,實(shí)驗(yàn)前將動(dòng)物兩側(cè)腎臟摘除,手術(shù)后幾小時(shí)或經(jīng)24小時(shí)后,給動(dòng)物靜脈注射或滴注腎提取物、腎素或人工合成的血管緊張素(Angiotensin)均可使血壓明顯升高。切除動(dòng)物腎臟后幾小時(shí),血中血管緊張素原(Angiotensinogen)即開始上升。24小時(shí)后可增達(dá)高峰,大白鼠血中血管緊張素原值可增加14~15倍,狗約增加3倍。從而大大提高了動(dòng)物對(duì)外源性腎臟加壓物質(zhì)的敏感性。

     4.體液性加壓物質(zhì)注射法

選用狗、貓或兔按2~8μg/Kg劑量靜脈注射腎上腺素或去甲腎上腺素時(shí),可引起血壓顯著而短暫的升高。給大白鼠靜脈注射0.5~3μg腎上腺素或去甲腎上腺素,亦可出現(xiàn)與上相似的血壓上升。若欲使血壓維持長時(shí)期的升高,可采取上述**靜脈滴注給藥。給狗或貓靜脈注射0.1~0.6μ后葉加壓素或給大白鼠靜脈注射0.006~0.008u后葉加壓素,均可導(dǎo)致受試動(dòng)物的血壓顯著上升,但重復(fù)注射易出現(xiàn)耐受現(xiàn)象。

     5.**胎盤缺血型急性高血壓法

選用妊娠家兔,通過胎盤作“Z”字形縫合,造成**胎盤缺血,手術(shù)后血壓逐漸升高,于1/2~2小時(shí)升達(dá)高峰。但注意縫線不要穿過**壁,否則將不發(fā)生高血壓。

九、附錄

   上海欣軟信息科技有限公司是一家專業(yè)從事研發(fā)銷售科研儀器設(shè)備的公司,并服務(wù)于神經(jīng)科學(xué)、生理學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等生命科學(xué)科研領(lǐng)域。自公司成立以來,憑借先進(jìn)的軟硬件配置及豐富的安裝經(jīng)驗(yàn),為相關(guān)領(lǐng)域的研究人員提供國際上*前沿的實(shí)驗(yàn)成套儀器,滿足各類研究的應(yīng)用需求。  

主營產(chǎn)品   常規(guī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭谱鳎◤?fù)制)方法

  1.學(xué)習(xí)記憶行為研究:Morris水迷宮、八臂迷宮、巴恩斯迷宮,Y迷宮,T迷宮,穿梭實(shí)驗(yàn)、避暗實(shí)驗(yàn)

  2.焦慮抑郁行為研究:高架十字迷宮、zero迷宮、零迷宮、強(qiáng)迫游泳,懸尾實(shí)驗(yàn),場(chǎng)景恐懼實(shí)驗(yàn),條件性恐懼實(shí)驗(yàn),震驚反射實(shí)驗(yàn),爬梯實(shí)驗(yàn)

  3.**成癮行為研究:條件性位置偏愛,cpp實(shí)驗(yàn),自身給藥系統(tǒng)

  4.神經(jīng)精神行為研究:洞板實(shí)驗(yàn),自發(fā)活動(dòng),曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn),聯(lián)合開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)

  5.運(yùn)動(dòng)疲勞行為研究:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)跑臺(tái)(段氏制造),轉(zhuǎn)輪疲勞儀,轉(zhuǎn)棒疲勞儀,福爾馬林疼痛實(shí)驗(yàn)研究系統(tǒng)

  6.藥理實(shí)驗(yàn):stoelting腦立體定位儀,科技型腦立體定位儀(國產(chǎn)研發(fā)),生物信號(hào)采集系統(tǒng),足趾容積測(cè)量儀等

 

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